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3D细胞培养是最近几年非常热门的一种细胞培养方式确实优势要比二级细胞培养多很多，但是3D细胞培养还可以使其变成漂亮的组织染色片，具体该如何操作呢？
2维（2D）培养的局限性和3维（3D）培养的优点引来诸多关注，一场细胞由2D培养走向3D的变革正在发生。3D培养系统大体可分为两种类型：基于scaffold的培养体系和无scaffold的培养体系。要想清楚的知道细胞或组织器官培养后的形态结构或者一些标志物特征，将3D培养的细胞做成组织切片放在载玻片上，再做H&E染色或其他染色非常有用。
如何让3D细胞培养变成漂亮的组织染色片？
第一步：切膜
在切膜或琼脂糖凝胶包埋前细胞要先用4%的多聚甲醛或10%中性福尔马林固定1小时左右。有细胞的PET膜，用剪刀剪成4片。沒膜的细胞pellets，当然不用切膜：
第二步 琼脂糖凝胶包埋
埋好的PET膜
悬浮3D Sphere 细胞直接与琼脂糖凝胶混合。
第三步 组织处理—脱水、脱脂、浸蜡
琼脂糖凝胶包埋好的胶块放入cassette准备处理。将放有琼脂糖凝胶包埋好的胶块的cassette放入全自动半封闭组织处理仪里脱水、脱脂、浸碏。
第四步 石碏包埋
第五步 修片和切片
第六步 染色
H&E染色，特殊染色和免疫染色
所以说想要变成漂亮的染色片，只要通过特殊的处理，就能够使3D细胞培养变成我们想要的染色片了，但是想要了解更加详细的步骤，或者是想要观看3D培养细胞的过程，可以去康宁平台上看一看。
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发表于 2020-8-22 10:01:45
